问题描述 | 可能原因 | 相应对策 |
精确度低 | 洗涤不完全 | 保证洗板机正常运行 保证充足的浸泡时间 |
拍板不完全 | 充分拍板至孔内无明显残留液体 | |
试剂混合不充分 | 保证溶液充分混合 | |
溶液被污染 | 重新配制溶液 | |
标准品稀释不正确 | 稀释液作为空白值；保证用最高浓度标准品精确稀释 保证按正确倍比梯度稀释 | |
标准曲线梯度差 | 洗涤不完全 | 保证洗板机正常运行 |
拍板不完全 | 充分拍板至孔内无残留液体 | |
每孔加液体积不等 | 检查移液器 必要时重新校准移液器 | |
加液错误 | 检查加液情况 | |
边缘效应 | 孔间温度不均 | 使用推荐的孵育时间和温度；控制加液间隔时间 |
封板覆膜封板不完全造成的溶液蒸发 | 保证正确使用封板覆膜 | |
实验中断 | 实验必须连续完成 标准品和样本需在实验前准备好 | |
背景值高 | 使用前试剂未平衡至室温 | 使用前试剂平衡至室温（18-25℃） |
洗涤不完全 | 保证洗板机正常运行 保证充足的浸泡时间 | |
拍板不完全 | 充分拍板至孔内无明显残留液体 | |
能建立标准曲线，但梯度差不明显 | 标准曲线稀释浓度计算不当 | 检查计算结果并重新建立标准曲线 |
洗涤不充分 | 保证充分洗涤 | |
封板覆膜重复使用 | 每一步使用新的封板覆膜 | |
没有使用封板覆膜 | 使用封板覆膜 | |
溶液被污染 | 重新配制溶液 | |
洗涤不完全 | 保证充分洗涤 如果使用自动洗板机，请检查所有出口是否干净且无堵塞 | |
孵育温度变化 | 使用推荐的孵育仪器和温度 避免将酶标板放置于变化的温度环境 | |
重复性差 | 封板覆膜重复使用 | 每一步使用新的封板覆膜 |
加液不正确 | 检查加液情况 | |
读数数值过低或无信号 | 溶液被污染 | 重新配制溶液 |
酶标仪波长设置错误 | 检查酶标仪 | |
未加终止液 | 每孔加入终止液 | |
孵育时间不充分 | 增加孵育时间 | |
孵育温度不稳定 | 检查恒温箱 | |
检测抗体或HRP酶稀释不正确或步骤颠倒 | 按说明书操作 | |
试剂盒失活 | 使用新的试剂盒 | |
试剂混合不充分 | 保证溶液充分混合 | |
HRP酶结合物不足 | 保证正确稀释 |
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